小鼠骨髓間充質干細胞是一種除造血干細胞以外的、具有多向分化潛能的干細胞，可以向骨、軟骨、肌組織、皮膚、脂肪、神經(jīng)等多種組織分化，因此可以作為組織工程中的種子細胞，在適當?shù)臈l件下，骨髓間充質干細胞可以分化為三個胚層來源的組織細胞而進行細胞移植的治療，在體外培養(yǎng)擴增后也可種植在生物材料上，回植入機體修復組織損傷。
充質干細胞在治療組織器官退行性疾病，遺傳缺陷性疾病和基因治療方面也展現(xiàn)了美好的前景，本產(chǎn)品具有良好的增殖和分化潛能，可分化為成骨細胞、脂肪細胞、軟骨細胞等，采用干冰保存運輸。收到細胞時，若干冰已經(jīng)*融化，請立即將細胞復蘇培養(yǎng)；若尚留有干冰，請立即將細胞放入液氮中保存待用，請按條件貯存細胞，切不可將細胞置于高溫環(huán)境。
方法步驟：
1、沿著脊髓切開，從身體的軀干解剖后肢，小心不要損傷股骨；
2、進一步解剖后肢，通過切開膝關節(jié)來切開每個后肢；從脛骨和股骨中去除肌肉和結締組織；將骨干刮干凈；
3、超凈臺操作，切斷骨髓腔末端下方的脛骨和股骨的末端；將裝有完整培養(yǎng)基的10 ml注射器上的27號針頭插入通過移除生長板暴露的海綿狀骨中，用1ml*培養(yǎng)基將骨髓塞從骨頭切開的末端沖洗出來，收集在冰上的10ml管中。
4、小鼠骨髓間充質干細胞通過70mm過濾網(wǎng)過濾細胞懸液，以去除任何骨針或肌肉和細胞團塊； 通過臺盼藍排除法測定細胞的產(chǎn)量和活力，并在血細胞計數(shù)器上計數(shù)。
5、在95mm培養(yǎng)皿中培養(yǎng)BM細胞，在1ml*培養(yǎng)基中，密度為25×106個/mL細胞（基于步驟4中獲得的細胞計數(shù)）；3h后更換新的*培養(yǎng)基。
6、再培養(yǎng)8小時后，用1.5ml新鮮的*培養(yǎng)基替換培養(yǎng)基；此后，每8小時重復該步驟，直至72小時的初始培養(yǎng)。
更新時間：2021-07-24
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