大鼠少突膠質前體細胞的使用和樣本的處理方法介紹

更新時間：2021-11-17

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　　大鼠少突膠質前體細胞使用方法：

　　1、收到細胞后，請按照以下方法進行操作：取出25cm2培養瓶，75%酒精擦拭培養瓶，拆下封口膜，細胞培養箱中靜置3-4小時以穩定細胞狀態，然后換用新鮮*培養液繼續培養或進行傳代。

　　2、細胞傳代：

　　1)細胞生長至覆蓋培養瓶的80%面積時，棄25cm2培養瓶中的培養液，清洗細胞一次。

　　2)添加0.25%胰蛋白酶消化液約1m至培養瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后加入*培養液終止消化，再輕輕吹打細胞使之脫落，然后將懸液轉移至15ml離心管中。

　　3)棄上清，沉淀細胞用12ml*培養基重懸，然后按1:2比例進行分瓶傳代，放入379C， 5%CO2細胞培養箱中培養。

　　4)待細胞*貼壁后，觀察培養結果，之后進行換液培養或傳代。

　　3、細胞凍存：

　　1)細胞生長至覆蓋培養瓶的80%面積時，棄25cm2培養瓶中的培養液，用PBS清洗細胞一次。

　　2)添加胰蛋白酶消化液約1m至培養瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后加入*培養液終止消化，輕輕吹打細胞使之脫落，然后將懸液轉移至15ml離心管中。

　　3)用適量的凍存液懸細胞，并放置于凍存管中。

　　4)先將大鼠少突膠質前體細胞凍存管放置于20°C 1.5h，然后將其移，入-80°C過夜， 24h后轉入液氨中進行長期保存。使用程序降溫盒可直接放入-80°C。

　　正確的處理樣本是保證ELISA檢測的正確性和準確性的一步，下面簡單介紹一下不同類型的樣本的處理方法：

　　1.血清。血清是常用于ELISA檢測的一類樣本，處理也比較簡單，采血過程中應避免溶血，因為紅細胞裂解時會釋放具有過氧化酶活性的物質，在以HRP為標記的ELISA檢測中會有非特異性的顯色，而導致檢測的不準確性。同時也應避免細菌污染，因為菌體內可能含有內源性的HRP從而導致檢測的假陽性。

　　2.血漿。用含抗凝劑的采血管或離心管采集血液標本，將上清分裝多份，-20℃或-80℃保存，避免反復凍融，避免使用溶血或高血脂的標本。

　　3.細胞培養上清，取細胞培養上清到離心管，除去細胞碎片及雜質，取上清，-20℃或-80℃保存，避免反復凍融。

　　4.細胞裂解液。

　　5.組織勻漿液。

　　6、尿液、唾液等其他液體生物樣本。